国产精品久久国产精麻豆,无码免费大香伊蕉在人线国产,久久精品国产蜜臂亚洲av高清,久久精品国产亚洲一区二区》

歡迎光臨北京和一生物科技有限公司網(wǎng)站!
誠信促進(jìn)發(fā)展,實(shí)力鑄就品牌
服務(wù)熱線:

18102086003

產(chǎn)品分類

Product category

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇常見問題!

發(fā)布時(shí)間: 2023-12-05  點(diǎn)擊次數(shù): 856次

 

 

凍存細(xì)胞一般常用胎牛血清(FBS)和二甲基亞砜(DMSO)。血清是維持細(xì)胞生存環(huán)境;DMSO是冷凍保護(hù)劑,使細(xì)胞免受低溫冰晶形成、及滲透壓改變而導(dǎo)致的物理損傷;

細(xì)胞培養(yǎng)理論上基本建議的是兩種:70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%胎牛血清或者10%DMSO+ 90%胎牛血清 。

但經(jīng)過有些實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過對比發(fā)現(xiàn):"10%的DMSO,90%的血清"復(fù)蘇效果相對比"70%培養(yǎng)基 + 10%DMSO+ 20%血清"好。

 

 

DMSO產(chǎn)品咱就不多說了,什么品牌都有,只要是選擇細(xì)胞培養(yǎng)級別的,效果應(yīng)該差不多。不過我用的是MP Biomedicals二甲基亞砜(DMSO),效果還可以。

對于胎牛血清的選擇就要相對謹(jǐn)慎了,市面上胎牛血清品牌可以說是魚龍混雜,剛看過新聞的客戶就會知道,高仿產(chǎn)品橫行。慎重起見,給大家推薦CellMax品牌胎牛血清,目前有澳洲血清(庫存緊張)和中國血源胎牛血清可供大家試用,購買。

 

 

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇需要注意哪些呢?

 

 

1、細(xì)胞本身的狀態(tài)

一般情況下細(xì)胞的復(fù)蘇還與原代細(xì)胞的活性有關(guān),如果要凍存的細(xì)胞懸液本身活性不高的話,后面復(fù)蘇的存活率也不高。

 

2、凍存細(xì)胞數(shù)量要足夠

無論你再怎么小心,細(xì)胞在冷凍和復(fù)蘇的時(shí)候都是最脆弱的,總會死掉一批。所以,一開始就要保證凍存細(xì)胞的數(shù)量足夠。

 

3、慢凍快融

一般情況下,細(xì)胞凍存時(shí)要遵循“慢凍快融"的原則。標(biāo)準(zhǔn)的降溫速度是1-2℃/min ,當(dāng)溫度到達(dá)-25℃,降溫速度可加快至5-10℃/min,到-80℃可直接入液氮。有些實(shí)驗(yàn)室是梯度凍存:4度,-20,-80,液氮,依次凍存。而復(fù)蘇速度越快越好。從液氮罐里取出來之后,迅速放在37°C水浴中,盡快融化

 

4、注意安全

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)里面最容易出事的部分。凡是和液氮接觸的操作,注意戴保護(hù)眼鏡和手套。注意:復(fù)蘇的時(shí)候,在水浴中搖搖動的時(shí)候會有爆炸的可能性。另外, DMSO是有毒致癌的。接觸的時(shí)候務(wù)必要帶好手套。

 

5、做好標(biāo)記

對于凍存細(xì)胞,一定要做好標(biāo)記。如:細(xì)胞名稱、代數(shù)和凍存日期。特別是公共實(shí)驗(yàn)室,更要做好標(biāo)記,避免找不到自己的細(xì)胞。

 

6、DMSO是否去除

由于DMSO是一種有毒致癌物質(zhì)。那么,解凍之后,應(yīng)不應(yīng)該去除凍存液中的DMSO呢?答案是no。除了極少數(shù)特別注明的對DMSO敏感的細(xì)胞外,99%的細(xì)胞都不需要去除DMSO。后面細(xì)胞培養(yǎng)中頻繁換液會慢慢去除掉DMSO。

 

 

聯(lián)


操我好舒服用力视频| 泡芙啪啪啪黄色污污| 男人的下面进女人的下面在线观看| 国产美女裸体视频全免费| 欧美日韩国产这里只有精品| 三级片成人京东热五月天| 黄色录像片操大逼的| 国产日韩精品v一区二区| 怎么样操女人的逼亚洲Av黄片段| 午夜福利国产三级片| 那种视频在线观看你懂的| 欧美综合区自拍亚洲综合| 留学生美女被大黑屌猛戳| 99爱国产精品免费视频| 日国产精品1卡二卡三卡| 日韩精品一区二区天堂| 亚洲男性天堂一区二区三区| 骚狐狸免费在线观看视频| 胸大裸体美女视频| 老头鸡巴操老太骚逼| 在线 中文字幕 第一页| 怎么样操女人的逼亚洲Av黄片段| 上萬網友分享a级国产乱| 爱爰哦好粗好猛操b视频| 人妻少妇精品视频12p| 91啪国线自产2019| 亚洲一级片在线播放| 国产无码久久久久久| 午夜十八禁福利亚洲一区二区| 粉色av一区二区三区| 久久精品一区二区三区免费看| 美女最骚逼逼视频| 国产欧美日本韩国一区二区| 女人扒开腿让我舔十八禁| 国产在线中文字幕一区二区三区| 人妻含泪让粗大挺进| 天天免费的无码AV| 爱男爽高潮鸡穴视频| 美国业余自由摘花管| 成年女人永久看片视频 | 91精品国产剧情欧美一区二区|